【摘 要】
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为了准确、高效地检出番茄斑萎病毒（tomato spotted wilt virus, TSWV），利用双启动寡核苷酸引物（DPO）技术，以TSWV外壳蛋白（CP）基因为靶基因，设计了一对DPO引物，对PCR反应体系中的引物、
【机 构】
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黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心,辽宁出入境检验检疫局,海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,东宁出入境检验检疫局
【基金项目】
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哈尔滨市科技创新人才研究专项(2012RFQQN029);国家质检总局科技计划项目(2013IK051)
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为了准确、高效地检出番茄斑萎病毒（tomato spotted wilt virus, TSWV），利用双启动寡核苷酸引物（DPO）技术，以TSWV外壳蛋白（CP）基因为靶基因，设计了一对DPO引物，对PCR反应体系中的引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶用量进行优化，建立了TSWV的DPO-PCR检测方法，并对其灵敏度、特异性以及退火温度敏感性进行了评价。结果表明，应用DPO引物建立的PCR技术能够成功地扩增出TSWV的208 bp特异性条带，与预期目标相符。经过优化后，DPO-PCR反应体系（25
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