【摘 要】
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采用TEK（0．2mol／LTris－HCLpH7．6．250mmol／LEDTA，200mg／L蛋白酶K）作为裂解剂处理样本，再用无水乙醇沉淀HCVRNA作为模板，用于多聚酶链反应检测HCVRNA，该法与AGPC法及TENS法比较，由于不使用SDS
【机 构】
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中山医科大学附属第三医院传染科!广州; 510630;
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采用TEK（0．2mol／LTris－HCLpH7．6．250mmol／LEDTA，200mg／L蛋白酶K）作为裂解剂处理样本，再用无水乙醇沉淀HCVRNA作为模板，用于多聚酶链反应检测HCVRNA，该法与AGPC法及TENS法比较，由于不使用SDS，避免TaqDNA多聚酶的强抑制原，省略了酚-氯抽提这一步骤，而又达到分高纯化RNA模板的目的。经对215例抗HCV阳性血清用上述三种方法进行比较分析，结果用三种方法制备的RNA模板进行多聚酶链反应，其HCVRNA阳性率无显著性差异．但TEK法较AGPC法及TENS法操作简单、稳定、不易污染，特异性好等优点，经用加挂生物素的合成寡核苷酸探针对HCVRNA逆转录PCR扩增产物作斑点杂交，显示有很好的特异性，具有明显的实用价值，批量测定在一个工作日可完成，此法的建立为制备RNA模板提供了方法及经验，适合标本量较大的临床单位使用，值得推广应用。
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