目的通过采用网络药理学方法,系统分析柴胡镇痛的主要作用机制及作用靶标,并初步阐明口服和注射两种给药方式下作用靶标差异,筛选可用于其质量评价的生物靶标并进行验证。方法基于数据库和文献检索收集柴胡的化学成分及其可能的作用靶标,以文献报道结合口服生物利用度和类药性作为区分口服制剂和注射用药药效成分的原则,从Gene Cards数据库中检索疼痛相关靶标,利用DIP蛋白质相互作用建立成分靶标与疼痛靶标的关联关系,构建柴胡镇痛的"药物成分-靶标-疾病"网络,通过网络分析筛选关键作用靶标并阐释其可能的机制。结果根据网络分析结果,共筛选出13个柴胡镇痛作用的主要靶标,包括胰蛋白酶原1、凝血酶原、二肽基肽酶4、乙酰胆碱酯酶、环氧化酶2、激素受体、雌激素受体、核受体辅助激活子1、一氧化氮合酶3等,主要影响细胞增殖、精氨酸分解代谢、血小板活化等过程。针对口服和注射两种不同给药方式下,主要作用靶点差异的分析结果表明,胰蛋白酶原1、环氧化酶2以及一氧化氮合酶3均为两种方式的主要作用靶标,可作为其生物评价的重要靶标;同时,注射剂成分对凝血酶原的过多作用可能与其不良反应有关。本研究选择环氧化酶2对柴胡的药效作用进行验证,体外试剂盒检测结果表明,柴胡质量浓度为3. 125～50μg·m L^-1时可对环氧化酶2活性产生显著直接抑制作用。结论网络药理学可有效预测不同给药方式下柴胡镇痛的作用靶标及机制,亦可为构建基于镇痛作用的柴胡质量生物评价方法提供参考。