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目的
筛选亚慢性砷暴露大鼠血清差异表达蛋白,并对与脂代谢有关的蛋白进行验证,为研究砷暴露人群脂代谢相关疾病的发生提供线索。
方法将60只Wistar大鼠按体重采用随机数字表法分为对照组和低、中、高剂量染砷组,各组饮水中亚砷酸钠含量分别为0、2、10、50 mg/L,每组15只。实验周期为12周。利用相对和绝对同位素定量标记(Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)蛋白质组学技术筛选对照组与高剂量染砷组之间的血清差异表达蛋白。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对筛选出的可能与脂代谢有关的差异表达蛋白进行验证。
结果大鼠血清中共鉴定出201个蛋白,有12个蛋白的表达量在对照组和高剂量染砷组间存在显著性差异,其中与脂代谢有关的为载脂蛋白A-Ⅱ(上调:高剂量染砷组/对照组= 1.40)和脂联素(下调:高剂量染砷组/对照组= 0.75)。ELISA法验证结果表明,对照组和低、中、高剂量染砷组大鼠血清载脂蛋白A-Ⅱ含量分别为(4.37 ± 1.08)、 (5.04 ± 0.37)、(4.94 ± 0.84)、 (4.65 ± 0.61 )μg/L,组间比较差异无统计学意义(F= 2.071,P > 0.05);4组大鼠血清脂联素含量分别为(1.06 ± 0.43)、(0.95 ± 0.42)、 (0.88 ± 0.28)、 (0.54 ± 0.17)mg/L,与对照组比较,高剂量染砷组表达水平显著下降(P < 0.05)。
结论利用iTRAQ蛋白质组学技术筛选出一组与亚慢性砷暴露有关的大鼠血清差异表达蛋白,并初步验证脂联素有可能作为砷暴露致健康损害的生物标志物。