人IP-10蛋白原核表达及其活性鉴定

来源 :华南国防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LinChu41
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目的构建人His标记的γ干扰素诱导蛋白10(interferon-γ-inducible protein10,IP-10)融合蛋白表达载体并在原核细胞中表达、纯化,获得有活性的IP-10蛋白,为进一步研究其在炎症过程中的作用机制及寻找新的抗炎途径提供基础。方法从人肺cDNA文库中PCR扩增无信号肽的IP-10基因编码序列,构建重组载体pET-14b/ID10;重组质粒经酶切、测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株;经异丙基γ-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导后,用镍离子亲和层析柱纯化融合蛋白,以T
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