【摘 要】
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[目的]探讨芍药汤通过有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（mitogen-activated protein kinase/extracellular signalregulated kinase,MAPK/ERK）通路对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）结肠黏膜损伤的修复作用和机制。[方法]经结肠缓慢推注5%三硝基苯磺酸（trinitrobenzene sulfo
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81573871、81774198）～～；
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[目的]探讨芍药汤通过有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（mitogen-activated protein kinase/extracellular signalregulated kinase,MAPK/ERK）通路对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）结肠黏膜损伤的修复作用和机制。[方法]经结肠缓慢推注5%三硝基苯磺酸（trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS）0.09 mL+无水乙醇0.06 mL，复制大鼠UC模型，将48只无特定病原体（specific pathogen free,SPF）SD大鼠随机分为正常组，模型组，芍药汤高、中、低剂量组与美沙拉嗪组。各组灌胃干预，评价疾病活动指数（disease activity index,DAI），观察组织病理变化并进行组织学活动指数（histological activity index,HAI）评分；以实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR）及免疫印迹法检测结肠组织中屏障保护相关指标的mRNA及蛋白表达水平。建立脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）小肠上皮细胞IEC-6损伤模型，以噻唑蓝比色法（dimethylthiahiazo,MTT）筛选药物最佳干预浓度，将细胞分为空白组、LPS组和芍药汤组，划痕实验观察细胞迁移率；免疫印迹法检测细胞闭锁小带蛋白-1（zonula occludens-1,ZO-1）蛋白表达水平。[结果]体内实验显示，与正常组比较，模型组大鼠肠黏膜结构缺失，黏膜下层和固有层可见明显的炎性细胞浸润；DAI、HAI评分显著升高（P＜0.01），紧密连接蛋白-2 （claudin-2）、磷酸化p38MAPK（phosphorylatedp38MAPK,p-p38MAPK）、磷酸化ERK1/2（phosphorylated-ERK1/2,p-ERK1/2）蛋白表达显著下调（P＜0.001,P＜0.01,P＜0.001）；肠三叶因子（intestinal trefoil factor,ITF）的mRNA表达显著降低（P＜0.05），缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）蛋白与mRNA表达显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，芍药汤各组病理损伤明显改善，DAI、HAI评分明显降低（P＜0.05,P＜0.01），芍药汤各组claudin-2、p-p38 MAPK、p-ERK1/2蛋白表达水平显著上调（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）,ITF mRNA表达量显著上调（P＜0.01）;HIF-1α蛋白与mRNA表达水平显著下调（P＜0.01）。体外实验显示，与空白组比较，LPS可明显抑制IEC-6细胞迁移（P＜0.01），下调ZO-1蛋白表达（P＜0.05）。与LPS组比较，芍药汤组细胞迁移率明显上升（P＜0.05,P＜0.01）,ZO-1蛋白表达明显上调（P＜0.05）。[结论]芍药汤对UC大鼠结肠黏膜损伤具有修复作用，其机制可能与激活MAPK/ERK通路，上调claudin-2、ZO-1，下调HIF-1α蛋白表达，促进肠黏膜上皮细胞迁移有关。
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