为了有效的将脑源性神经营养因子 (BDNF)和神经营养素 3 (NT3 )送入神经系统 ,以达到对神经系统退行性疾病和神经损伤的治疗目的 ,构建了人BDNF和NT3重组腺病毒。首先构建了带有CMV BDNF BGHpA和CMV NT3 BGHpA表达盒的腺病毒穿梭表达载体 ,与pJM17共转染 2 93细胞后经同源重组获得了人BDNF和NT3重组腺病毒。经PCR鉴定后 ,CsCl超离心纯化获得了滴度分别为 1× 10 12 和 8× 10 11的BDNF和NT3重组腺病毒。为了检测BDNF和NT3基因的表达 ,HeLa细胞在感染后 3d ,提取细胞总RNA进行RT PCR反应 ,Wes tern印迹和ELISA分析检测外源基因的表达产物 ,结果显示BDNF和NT3基因在重组腺病毒中可有效的转录和翻译。同时感染后的HeLa细胞上清可有效的促进八日龄鸡胚背根神经节组织块突起的生长 ,这说明表达的蛋白质具有良好的生物学活性。