【摘 要】
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目的构建pMal/N重组表达载体,转化E.coli DH5α,诱导表达犬瘟热病毒(CDV)重组核衣壳(N)蛋白.方法采用RT-PCR技术,从CDV RNA中扩增编码N蛋白的基因片段,通过连接反应,构建重组
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目的构建pMal/N重组表达载体,转化E.coli DH5α,诱导表达犬瘟热病毒(CDV)重组核衣壳(N)蛋白.方法采用RT-PCR技术,从CDV RNA中扩增编码N蛋白的基因片段,通过连接反应,构建重组克隆载体和重组表达载体,转化感受态.E. coli DH5α细胞.通过IPTG诱导表达CDV重组N蛋白.结果扩增出约1.7kb CDV全长的主要结构蛋白N蛋白基因,通过PCR获得536bp N蛋白基因片段.将N蛋白基因片段克隆入原核表达载体pMal-C2,表达产物麦芽糖结合蛋白(MAP)与N蛋白的融合蛋白的相对分子质量约60×103,与预期大小一致.结论构建的pMal/N重组载体所表达的CDV N蛋白为进一步研究CDV的特异、敏感的抗体检测方法打下基础.
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