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以大白猪基因组DNA为模板，利用PCR扩增miRNA-143前体序列，构建重组载体pEGP—miR-143，转染猪胎儿成纤维细胞，通过荧光观察转染效率和报告基因表达效率，再利用实时荧光定量PCR（QRT-PCR）测定细胞内miRNA-143的表达，以检测外源基因的表达活性；对PCR产物进行测序鉴定及重组载体酶切验证。结果表明：成功构建了pEGP—miR-143载体；转染细胞后进行荧光观察，载体中GFP有较好的表达活性；QRT-PCR表明，与对照组细胞相比，试验组miRNA-143表达有显著提升，差异极显著