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摘要：通过观察新型功能性蜜枣对小鼠运动能力的影响，探讨其抗运动疲劳作用。將小鼠随机分为空白对照组、阿胶蜜枣对照组、补中益气丸阳性对照组、功能性蜜枣低剂量组、高剂量组。连续灌胃14天后，测定小鼠力竭游泳时间、爬杆力竭时间，测定血乳酸、肌酐及肝糖原含量。实验结果显示，功能性蜜枣高、低剂量组能显著延长小鼠力竭游泳时间和力竭爬杆时间，降低血乳酸、肌酐、肝糖原含量。说明功能性蜜枣可改善小鼠运动疲劳的状态，从而起到抗疲劳作用。
关键词：新型功能性蜜枣 抗运动疲劳 游泳实验 爬杆实验
新型功能性蜜枣是以大枣为原料，依据中医药理论组方，辅以山药、薏苡仁、莲子、黄精、百合、龙眼肉等多味药食两用中药组方加工、研制而成的新型功能保健食品，能益气健脾、滋阴养血，具有阴阳双补的作用。本实验通过观察功能性蜜枣对耐力运动小鼠肝糖原含量、肌酐含量和血乳酸代谢水平及小鼠运动能力的影响，探讨新型功能性蜜枣的抗疲劳作用及其可能机制。现将研究结果总结如下。
1 材料
1.1 动物 健康雄性KM小鼠，清洁级，体重18~23g，由河北省实验动物中心提供，许可证为SCXK（冀）2008－1－003，动物饲料亦由该中心提供。
1.2 材料与试剂 功能性蜜枣由大枣、山药、龙眼肉、薏苡仁、莲子、百合、黄精等为原料加工制得，实验时在河北医科大学中医学院中药化学实验室水提浓缩成相应浓度。补中益气丸，购自马鞍山神鹿科瑞药业有限公司（国药准字Z34020664）。阿胶蜜枣，产地为河北沧州。
1.3 主要仪器 MB10Kpw型电子天平，JA2003 SHP07003型精密电子天平，血乳酸测试盒，肝糖原测试盒，肌酐测试盒，722型分光光度计。
2 方法
2.1 实验材料的准备 将补中益气丸按照5粒/10ml的浓度溶于蒸馏水，作为阳性对照。取功能性蜜枣10枚，水提浓缩至200ml，作为功能性蜜枣高剂量组。将高剂量组水提液稀释一倍，作为功能性蜜枣低剂量组。取阿胶蜜枣10枚，水提浓缩至200ml，为阿胶蜜枣对照组。
2.2 分组与给药 取小鼠170只，适应性游泳及爬杆实验两天，每天10分钟，淘汰不会游泳及爬杆的小鼠。剩余150只小鼠随机分成5组， 每组30只，分别为空白组（灌胃蒸馏水）、阿胶蜜枣对照组（灌胃阿胶蜜枣水提液）、补中益气丸对照组（灌胃补中益气丸混悬液）、功能性蜜枣高剂量组（灌胃高剂量功能性蜜枣水提液）及功能性蜜枣低剂量组（灌胃低剂量功能性蜜枣水提液）。各组小鼠按照0.2ml/10g体重每日在同等条件下灌胃1次，连续14天。
2.3 检测指标及方法
2.3.1 游泳实验 灌胃10天后，在末次给药后1小时，随机从每组中抽取10只小鼠，尾部负荷5%体重的重物，放入水深20cm 、温度25℃±1℃的恒温水槽内游泳。观察并记录小鼠自放入水槽至沉入水槽底无力再冲起（处于力竭状态）时间，即为小鼠游泳时间。
2.3.2 爬杆实验 灌胃10天后，在末次给药后1小时，从每组剩余小鼠中随机抽取10只，置于长110cm、直径0.7cm的光滑玻璃杆上。观察小鼠自置于杆上至肌肉疲劳无力，从玻璃杆上滑落下来的时间。
2.3.3 血乳酸、肌酐、肝糖原含量测定 灌胃10天后，在末次给药后1小时，将每组剩余小鼠置于水深20cm、温度25℃±1℃的恒温水槽内正常游泳30分钟。游泳后休息30分钟，小鼠摘眼球取血，用血乳酸测定仪测定血乳酸水平，用碱性苦味酸动力法（Jaffe 法）测定肌酐含量。将小鼠颈椎脱臼处死，剖开腹腔，取一叶肝脏，用蒽酮法测定肝糖原含量。
2.4 数据处理 采用SPSS12.0统计软件进行统计学分析，数据用X±S表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析。
3 结果
3.1 功能性蜜枣对小鼠负重游泳能力的影响 阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高剂量组及低剂量组小鼠负重游泳时间显著高于空白组（P<0.01），提示阿胶蜜枣及功能性蜜枣均能有效提高小鼠抗疲劳能力。各组小鼠负重游泳时间见表1。
3.2 功能性蜜枣对小鼠爬杆能力的影响 阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高剂量组及低剂量组小鼠爬杆时间显著高于空白组（P<0.01），也表明阿胶蜜枣及功能性蜜枣均能有效提高小鼠抗疲劳能力。各组小鼠爬杆时间见表1。
注：与空白组比较， **：P<0.01
3.3 功能性蜜枣对小鼠血乳酸、肌酐、肝糖原含量的影响 功能性蜜枣高、低剂量组小鼠血肌酐含量均显著低于空白组及阿胶蜜枣对照组（P<0.01），阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高、低剂量组小鼠肝糖原较空白组明显升高（P<0.05），阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高、低剂量组小鼠血乳酸含量较空白组有降低趋势。结果见表2。
注：与空白组比较，*：P<0.05， **：P<0.01
4 讨论
机体抗疲劳能力加强可提高机体的运动能力，小鼠游泳力竭时间及爬杆时间是反映动物运动疲劳程度的常用指标。本研究结果显示，功能性蜜枣组及阳性组能明显延长小鼠游泳时间、爬杆时间，延缓小鼠运动性疲劳的出现，进而提高小鼠耐力运动能力，提示功能性蜜枣确有抗运动性疲劳作用。
运动需要人体能源物质供能，但体内能源物质储备有限，在短时间、高强度的运动中，物质大量消耗，首先减少的是糖原。当糖原耗竭后，血糖浓度降低，中枢神经系统供能不利而出现疲劳。肝糖原储备越充足，它提供运动所需的能量就越多，疲劳就会延迟出现。本研究结果显示，功能性蜜枣能够通过增加小鼠肝糖原储备，维持机体运动时血糖水平，从而为机体提供更多的能量来达到抗疲劳的目的。
机体进行运动时，需氧量大于吸氧量，能量主要来源于无氧代谢，产生代谢产物乳酸等。这些物质在体内大量积蓄，使肌细胞内pH值下降，降低肌肉活动功能而产生疲劳。因此乳酸水平是反映机体的有氧代谢能力和疲劳程度的重要指标，提高加速乳酸的消除速度也是提高机体抗疲劳能力的途径之一。本研究显示，功能性蜜枣有减少小鼠运动时的乳酸生成量的倾向，可加速疲劳的消除。
肌酐是人体肌肉代谢的产物，大运动量时，肾功能可能损伤使肾小球滤过率而使肌酐含量发生变化。本实验研究显示，功能性蜜枣可显著降低血肌酐含量，提示其可保护肾脏，防止运动时肾功能损伤，使肾小球滤过率保持在正常水平或加速肌酐的清除而抗起到抗疲劳的作用。
参考文献：
[1]张钟，吴茂东.大枣多糖对小鼠化学性肝损伤的保护作用和抗疲劳作用[J].南京农业大学学报，2006，29(1):94～97.
[2]李春福.运用生物化学原理揭示人体肌肉运动的主要能量来源[J].中国校外教育（理论），2008，1:106.
[3]陈奇主编.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1996：670-671.
[4]杨新宇.抗运动性疲劳动物模型的思考[J].药理学杂志，2001，23(5): 36-38.
关键词：新型功能性蜜枣 抗运动疲劳 游泳实验 爬杆实验
新型功能性蜜枣是以大枣为原料，依据中医药理论组方，辅以山药、薏苡仁、莲子、黄精、百合、龙眼肉等多味药食两用中药组方加工、研制而成的新型功能保健食品，能益气健脾、滋阴养血，具有阴阳双补的作用。本实验通过观察功能性蜜枣对耐力运动小鼠肝糖原含量、肌酐含量和血乳酸代谢水平及小鼠运动能力的影响，探讨新型功能性蜜枣的抗疲劳作用及其可能机制。现将研究结果总结如下。
1 材料
1.1 动物 健康雄性KM小鼠，清洁级，体重18~23g，由河北省实验动物中心提供，许可证为SCXK（冀）2008－1－003，动物饲料亦由该中心提供。
1.2 材料与试剂 功能性蜜枣由大枣、山药、龙眼肉、薏苡仁、莲子、百合、黄精等为原料加工制得，实验时在河北医科大学中医学院中药化学实验室水提浓缩成相应浓度。补中益气丸，购自马鞍山神鹿科瑞药业有限公司（国药准字Z34020664）。阿胶蜜枣，产地为河北沧州。
1.3 主要仪器 MB10Kpw型电子天平，JA2003 SHP07003型精密电子天平，血乳酸测试盒，肝糖原测试盒，肌酐测试盒，722型分光光度计。
2 方法
2.1 实验材料的准备 将补中益气丸按照5粒/10ml的浓度溶于蒸馏水，作为阳性对照。取功能性蜜枣10枚，水提浓缩至200ml，作为功能性蜜枣高剂量组。将高剂量组水提液稀释一倍，作为功能性蜜枣低剂量组。取阿胶蜜枣10枚，水提浓缩至200ml，为阿胶蜜枣对照组。
2.2 分组与给药 取小鼠170只，适应性游泳及爬杆实验两天，每天10分钟，淘汰不会游泳及爬杆的小鼠。剩余150只小鼠随机分成5组， 每组30只，分别为空白组（灌胃蒸馏水）、阿胶蜜枣对照组（灌胃阿胶蜜枣水提液）、补中益气丸对照组（灌胃补中益气丸混悬液）、功能性蜜枣高剂量组（灌胃高剂量功能性蜜枣水提液）及功能性蜜枣低剂量组（灌胃低剂量功能性蜜枣水提液）。各组小鼠按照0.2ml/10g体重每日在同等条件下灌胃1次，连续14天。
2.3 检测指标及方法
2.3.1 游泳实验 灌胃10天后，在末次给药后1小时，随机从每组中抽取10只小鼠，尾部负荷5%体重的重物，放入水深20cm 、温度25℃±1℃的恒温水槽内游泳。观察并记录小鼠自放入水槽至沉入水槽底无力再冲起（处于力竭状态）时间，即为小鼠游泳时间。
2.3.2 爬杆实验 灌胃10天后，在末次给药后1小时，从每组剩余小鼠中随机抽取10只，置于长110cm、直径0.7cm的光滑玻璃杆上。观察小鼠自置于杆上至肌肉疲劳无力，从玻璃杆上滑落下来的时间。
2.3.3 血乳酸、肌酐、肝糖原含量测定 灌胃10天后，在末次给药后1小时，将每组剩余小鼠置于水深20cm、温度25℃±1℃的恒温水槽内正常游泳30分钟。游泳后休息30分钟，小鼠摘眼球取血，用血乳酸测定仪测定血乳酸水平，用碱性苦味酸动力法（Jaffe 法）测定肌酐含量。将小鼠颈椎脱臼处死，剖开腹腔，取一叶肝脏，用蒽酮法测定肝糖原含量。
2.4 数据处理 采用SPSS12.0统计软件进行统计学分析，数据用X±S表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析。
3 结果
3.1 功能性蜜枣对小鼠负重游泳能力的影响 阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高剂量组及低剂量组小鼠负重游泳时间显著高于空白组（P<0.01），提示阿胶蜜枣及功能性蜜枣均能有效提高小鼠抗疲劳能力。各组小鼠负重游泳时间见表1。
3.2 功能性蜜枣对小鼠爬杆能力的影响 阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高剂量组及低剂量组小鼠爬杆时间显著高于空白组（P<0.01），也表明阿胶蜜枣及功能性蜜枣均能有效提高小鼠抗疲劳能力。各组小鼠爬杆时间见表1。
注：与空白组比较， **：P<0.01
3.3 功能性蜜枣对小鼠血乳酸、肌酐、肝糖原含量的影响 功能性蜜枣高、低剂量组小鼠血肌酐含量均显著低于空白组及阿胶蜜枣对照组（P<0.01），阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高、低剂量组小鼠肝糖原较空白组明显升高（P<0.05），阿胶蜜枣对照组、功能性蜜枣高、低剂量组小鼠血乳酸含量较空白组有降低趋势。结果见表2。
注：与空白组比较，*：P<0.05， **：P<0.01
4 讨论
机体抗疲劳能力加强可提高机体的运动能力，小鼠游泳力竭时间及爬杆时间是反映动物运动疲劳程度的常用指标。本研究结果显示，功能性蜜枣组及阳性组能明显延长小鼠游泳时间、爬杆时间，延缓小鼠运动性疲劳的出现，进而提高小鼠耐力运动能力，提示功能性蜜枣确有抗运动性疲劳作用。
运动需要人体能源物质供能，但体内能源物质储备有限，在短时间、高强度的运动中，物质大量消耗，首先减少的是糖原。当糖原耗竭后，血糖浓度降低，中枢神经系统供能不利而出现疲劳。肝糖原储备越充足，它提供运动所需的能量就越多，疲劳就会延迟出现。本研究结果显示，功能性蜜枣能够通过增加小鼠肝糖原储备，维持机体运动时血糖水平，从而为机体提供更多的能量来达到抗疲劳的目的。
机体进行运动时，需氧量大于吸氧量，能量主要来源于无氧代谢，产生代谢产物乳酸等。这些物质在体内大量积蓄，使肌细胞内pH值下降，降低肌肉活动功能而产生疲劳。因此乳酸水平是反映机体的有氧代谢能力和疲劳程度的重要指标，提高加速乳酸的消除速度也是提高机体抗疲劳能力的途径之一。本研究显示，功能性蜜枣有减少小鼠运动时的乳酸生成量的倾向，可加速疲劳的消除。
肌酐是人体肌肉代谢的产物，大运动量时，肾功能可能损伤使肾小球滤过率而使肌酐含量发生变化。本实验研究显示，功能性蜜枣可显著降低血肌酐含量，提示其可保护肾脏，防止运动时肾功能损伤，使肾小球滤过率保持在正常水平或加速肌酐的清除而抗起到抗疲劳的作用。
参考文献：
[1]张钟，吴茂东.大枣多糖对小鼠化学性肝损伤的保护作用和抗疲劳作用[J].南京农业大学学报，2006，29(1):94～97.
[2]李春福.运用生物化学原理揭示人体肌肉运动的主要能量来源[J].中国校外教育（理论），2008，1:106.
[3]陈奇主编.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1996：670-671.
[4]杨新宇.抗运动性疲劳动物模型的思考[J].药理学杂志，2001，23(5): 36-38.