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根据所测定的中国产家蚕CBM1和CBM2 cDNA序列,设计成熟肽的特异性引物,将此基因与凝血因子Xa(FXa)的切割序列以PCR方法连接起来,克隆至pGEX-KG表达质粒中.该载体为改进的GST融合表达质粒,所携带的6个Gly有助于提高FXa的切割效率.克隆得到的融合载体在大肠杆菌JM109中扩增和筛选.经DNA测序,证实为含有正确序列的乙酰化的pGEX-KG-FXa-NCBM1(pKG-FXa-NCBM1)、非乙酰化的pGEX-KG-FXa-CBM1(pKG-FXa-CBM1)和乙酰化的pGEX-KG