【摘 要】
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目的 研究人重组C5a (human-recombinant C5a,rh-C5a)对人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells, HPMECs)表达组织因子(tissue factor,TF)的影
【机 构】
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广州军区广州总医院MICU科,广州,510010
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目的 研究人重组C5a (human-recombinant C5a,rh-C5a)对人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells, HPMECs)表达组织因子(tissue factor,TF)的影响.方法 用不同浓度(100、200、300 μg/L)的rh-C5a刺激HPMECs 8 h和同一浓度(200 μg/L)的rh-C5a刺激HPMECs 4、8、12 h.采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测TF基因和蛋白表达情况.选取刺激浓度为200 μg/L,作用时间为8 h组进行C5a反义肽R4干预,相同的方法检测TF基因和蛋白表达并用免疫组织化学方法定性检测NF-κB p65变化. 结果正常的HPMECs基本不表达TF,rh-C5a刺激后,TF mRNA和蛋白开始表达,刺激的12 h内呈现出时效和量效关系(P<0.05).用C5a反义肽R4干预后,TF mRNA水平降至未干预组的68%(P<0.05),蛋白表达也有下降.免疫组织化学示p65在胞浆内明显增加并有部分入核.结论 在刺激的12 h内,C5a对HPMECs表达TF 存在时间-浓度的依赖关系,机制可能是C5a与其受体结合后,通过细胞信号转导途径活化NF-κB,从而调节基因和蛋白的表达.
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