【摘 要】
：
目的探讨Wnt信号通路和表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼耐药中的作用及其机制。方法运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和免疫印迹实验(Western blot)检测E
【机 构】
：
广州医科大学附属肿瘤医院广州医科大学肿瘤研究所;
【基金项目】
：
国家自然科学基金资助项目(81872450);广州市卫生和计划生育科技项目(20181A011093,20191A011099);广东省医学科学技术研究基金项目(B2019063);广州市医学重点学科建设项目
论文部分内容阅读
目的探讨Wnt信号通路和表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼耐药中的作用及其机制。方法运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和免疫印迹实验(Western blot)检测EGFR在亲代HCC827细胞与吉非替尼耐药细胞(HCC827/R)中的表达;免疫组化染色检测耐药前后3对NSCLC肿瘤组织中EGFR的表达。双荧光素酶报告基因实验(Luciferase)检测亲代HCC827细胞与耐药HCC827/R细胞Wnt信号通路活化情况;在Jaspar数据库中预测EGFR基因启动子区上TCF/LEF转录因子结合位点;染色质免疫共沉淀实验(Chip)和Luciferase实验检测转录因子对基因表达的调控;功能阻断实验检测Wnt信号通路/EGFR途径介导吉非替尼耐药的作用。结果与亲代HCC827细胞相比较,HCC827/R细胞的EGFR在mRNA和蛋白水平表达均明显增高(P<0.05)。免疫组化染色结果显示在3例吉非替尼耐药前后NSCLC配对肿瘤组织样品中有2例耐药后EGFR表达较耐药前增加。Luciferase实验结果显示,与亲代细胞比较,Wnt/β-catenin信号通路在耐药HCC827/R细胞中异常活化(P<0.05)。生物信息学分析预测到EGFR基因启动子区-1476～-1468区域存在Wnt/β-catenin信号通路下游转录因子TCF3/TCF4结合位点,Chip和Luciferase实验证实Wnt/β-catenin信号通路可转录上调EGFR表达。功能阻断实验结果显示当利用Wnt3a刺激亲代HCC827细胞的同时敲低EGFR,吉非替尼对细胞的抑制率较单独利用Wnt3a刺激细胞时的细胞抑制率得到恢复(P<0.05)。结论 Wnt/β-catenin信号通路转录上调EGFR促进NSCLC的吉非替尼耐药,其为提高NSCLC吉非替尼靶向治疗效果提供了新的实验依据。
其他文献
目的分析川东北地区泌尿系结石的发病情况、成分以及分布特征,为其治疗及预防提供参考依据。方法回顾性分析2017年4月至2019年4月南充市中心医院收治的1564例泌尿系结石患者
小型电激励连续波HF/DF化学激光器具有广泛的用途和重要基础研究价值,本文介绍了四种放电类型的小型电激励连续波HF/DF化学激光器的研究工作,并对各类型激光器的优缺点进行了
德育是教师有目的地培养学生品德的一种活动,它不仅依靠直接的德育课堂教学,更多的是渗透于各个学科的教学活动中。作为中职语文教师,我们要充分利用语文课堂教学,通过德育渗
20世纪的最后一年,光存储设备厂商仍然摆脱不了旧日的情怀,依然进行着你死我活的残酷的竞争中。这里面既有痛苦,也有欢乐,你方唱罢我登场,共同演绎着没有最终结局的故事。本
文章以于家堡金融区起步区为背景,对区域内规划及建设方式的把控进行了分析,对大规模建筑群建设方式尤其基坑等高投入、高风险的临时工程进行详细研究,对常规工程经验进行创
近距离测量外腔式结构HF/DF激光器的输出光谱时,观察到部分HF激光谱线不合常规地强度较弱甚至消失。利用MODTRAN软件对光谱中各支谱线的大气传输透过率进行了计算,发现这些HF
以杭州中润中心工程为例,通过分析该高层建筑地下室渗漏的原因。针对建筑物出现的不同渗漏情况从埋管压浆、混凝土空洞部位、堵漏三个方面的具体治理施工进行了详细阐述。
版画，作为一种古老的又时时焕发出青春魅力的画种，在中国的艺术教育领域占据着重要的地位，从“国、版、油、雕”一直是全国各大美术学院绘画专业的基本配置这一现象就可见端倪。
时至2020年2月4日24时,国内累计报告确诊病例24363例,累计死亡病例491例、治愈出院病例892例。疑似病例23260例。中国地图,疫情铺满屏。守望相助,共克时艰。疫情必将过去,太
对纳米零价铁耦合微生物体系的还原脱氮反应条件、效果、应用前景等方面进行综述,以期对于污水处理厂技术的改进提供理论依据和设计运行参数参考,同时为纳米零价铁耦合微生物