人宫颈癌紫杉醇耐药细胞株Hela/PTX的建立及其生物特性研究

来源 :中国药师 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lie_luren
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目的:建立人宫颈癌紫杉醇耐药细胞株Hela/PTX,并考察其生物学特性。方法:以人宫颈癌Hela细胞为亲本细胞,采用低浓度持续诱导法建立紫杉醇耐药细胞株Hela/PTX。在显微镜下观察细胞形态学的变化;采用CCK-8法检测耐药细胞株对不同化疗药物的耐药性;采用高效液相色谱法测定细胞中药物的蓄积;采用Western blot法和实时荧光定量PCR技术分别检测细胞中P糖蛋白(P-gp)、Survivin蛋白和mRNA表达。结果:成功建立Hela/PTX多药耐药细胞株,其对PTX的耐药数是58.40,且对多西他赛和氟尿嘧啶有交叉耐药,耐药指数分别为8.11,4.62。Hela/PTX细胞中P-gp和Survivin的mRNA表达水平分别是Hela细胞的(9.93±0.90)倍(P<0.05)、(3.02±0.57)倍(P<0.05)。在耐药细胞中P-gp和Survivin的蛋白表达水平明显高于亲本细胞。结论:成功构建了人宫颈癌耐药细胞株Hela/PTX,具有多药耐药的基本生物学特性,可做为紫杉醇耐药机制研究的体外模型及为宫颈癌多药耐药机制的研究提供实验基础。
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