【摘 要】
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目的:探讨膜联蛋白A7(ANXA7)在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞生物学特性的影响.方法:收集肾癌组织及癌旁组织标本各80例,使用RT-qPCR和免疫组化检测ANXA7的表达.将患者临床病理信息与ANXA7的表达进行相关性分析,采用Kaplan-Meier生存曲线分析ANXA7与肾癌预后的关系.将经过慢病毒包装的ANXA7和sh-ANXA7质粒分别转染至人肾癌786-O细胞,细胞分为Control组(未转染)、NC组(转染慢病毒质粒空载)、ANXA7组(转染pHRi-ANXA7)、sh-ANXA7组(转染
【机 构】
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山西省太原市中心医院,山西太原030009
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目的:探讨膜联蛋白A7(ANXA7)在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞生物学特性的影响.方法:收集肾癌组织及癌旁组织标本各80例,使用RT-qPCR和免疫组化检测ANXA7的表达.将患者临床病理信息与ANXA7的表达进行相关性分析,采用Kaplan-Meier生存曲线分析ANXA7与肾癌预后的关系.将经过慢病毒包装的ANXA7和sh-ANXA7质粒分别转染至人肾癌786-O细胞,细胞分为Control组(未转染)、NC组(转染慢病毒质粒空载)、ANXA7组(转染pHRi-ANXA7)、sh-ANXA7组(转染pHRi sh-ANXA7).采用克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫共沉淀分析ANXA7与表皮生长因子受体(EGFR)的相互作用;Western Blot检测磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路相关蛋白的表达.结果:与癌旁组织相比,肾癌组织中ANXA7 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05).ANXA7的表达与不同Fuhrman分级、淋巴结转移和肿瘤TNM分期均显著相关(P<0.05),且ANXA7阳性表达组生存率显著高于阴性表达组(P<0.05).与NC组相比,ANXA7组克隆数明显减少(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05);sh-ANXA7组克隆数明显增加(P<0.05),细胞凋亡率明显减少(P<0.05).ANXA7和EGFR存在相互作用,过表达EGFR促进PI3K和磷酸化AKT的表达,ANXA7和EGFR共表达比EGFR单独表达组PI3K和磷酸化AKT表达水平降低(P<0.05).结论:ANXA7在肾癌组织中低表达,ANXA7能够在肾癌细胞中与EGFR相互作用,并抑制肾癌细胞增殖,促进肾癌细胞凋亡.
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