【摘 要】
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目的确定用Alw21 I限制性内切酶切割PCR(聚合酶链反应)扩增葡萄糖激酶基因启动子区-30位点的最适实验条件.方法按一定梯度设定酶切所用扩增产物量、内切酶的浓度、酶切时间,
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目的确定用Alw21 I限制性内切酶切割PCR(聚合酶链反应)扩增葡萄糖激酶基因启动子区-30位点的最适实验条件.方法按一定梯度设定酶切所用扩增产物量、内切酶的浓度、酶切时间,用2 g/dl低熔点琼脂糖凝胶(含0.5μg/ml的溴乙锭)电泳,透射式紫外灯下观察酶切结果.结果20 μl的酶切体系中,最适酶切产物为5μl,最适内切酶量为5U,酶切时间应超过9 h.结论参数偏离最适条件将会导致实验失败.
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