重组人IL-29的原核表达、纯化及活性分析

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：woshirenaaa

【摘要】

：

目的：在大肠杆菌中表达具有活性的重组人白细胞介素-29（IL-29）．方法：用PCR技术扩增人IL-29成熟蛋白的编码序列，克隆入原核表达载体pET-44Ek／LIC中，构建融合表达载体pET-44EICLIC—IL-

【作者】

：

李明才何韶衡

【机构】

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汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所

【出处】

：

第四军医大学学报

【发表日期】

：

2006年23期

【关键词】

：

白细胞介素-29 大肠杆菌可溶性蛋白质纯化 interleukin-29 Esdmriefiia eoli soluble protein purif

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30671932）,李嘉诚基金（C0200001）,广东省卫生厅立项课题（A2003484）

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目的：在大肠杆菌中表达具有活性的重组人白细胞介素-29（IL-29）．方法：用PCR技术扩增人IL-29成熟蛋白的编码序列，克隆入原核表达载体pET-44Ek／LIC中，构建融合表达载体pET-44EICLIC—IL-29，转化大肠杆菌BL21（DE3），以IPTG诱导表达IL-29融合蛋白，经镍柱亲和层析纯化，然后用肠激酶消化除去N端融合标签得到完全天然状态的重组人IL-29，经N-端氨基酸测序鉴定纯化的IL-29，用细胞病变抑制法测定其活性．结果：成功构建了表达载体pET-44Ek／LIC-IL-29

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