【摘 要】
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目的:初步研究微小RNA-29b(miR-29b)介导的TGF-β/Smad信号通路在肝星状细胞(HSC)活化中的作用及其对大鼠肝纤维化进程的影响。方法:构建肝纤维化大鼠模型并分离其HSC,同时通
【基金项目】
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武汉市卫生局项目(No.WX15D24)
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目的:初步研究微小RNA-29b(miR-29b)介导的TGF-β/Smad信号通路在肝星状细胞(HSC)活化中的作用及其对大鼠肝纤维化进程的影响。方法:构建肝纤维化大鼠模型并分离其HSC,同时通过体外获取并鉴定正常大鼠HSC。运用RT-qPCR和Western blot检测以上获取细胞中miR-29b、TGF-β/Smad信号通路相关蛋白和肝纤维化标志蛋白的变化水平,并通过双萤光素酶报告基因检测系统鉴定miR-29b对TGF-β1的直接靶向结合情况。结果:随着HSC活化加深,miR-29b的表达量逐渐减少(P<0.01),而HSC活性标志物Ⅰ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的表达量逐渐增加(P<0.01)。在TGF-β/Smad信号通路中,Smad2/3/4的表达显著增加,而Smad7的表达明显下降(P<0.01)。双萤光素酶报告基因检测结果显示,miR-29b可直接结合于TGF-β1 3’UTR的“UCUCUCCGU”序列,表明TGF-β1为miR-29b的一个下游靶基因。结论:miR-29b可参与抑制HSC的活化和迁移,进而抑制肝纤维化进程,而其生物学功能可能是通过直接靶向抑制TGF-β1进而调控TGF-β/Smad信号通路实现的。
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