【摘 要】
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稀有鱼句鲫是一种新型的模式实验鱼,具有利用转基因技术培育开发成为观赏性鱼类的潜在可能.本实验采用PCR方法,从稀有鱼句鲫基因组DNA中分离得到大小为1 584bp的β肌动蛋白(
【基金项目】
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上海市教育委员会重点学科建设项目;
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稀有鱼句鲫是一种新型的模式实验鱼,具有利用转基因技术培育开发成为观赏性鱼类的潜在可能.本实验采用PCR方法,从稀有鱼句鲫基因组DNA中分离得到大小为1 584bp的β肌动蛋白(β-actin)基因片段.序列分析表明,该片段包括长为1 507bp的启动调控区和77bp的部分转录区序列.启动调控区包括一段长为109bp β-actin基因上游调控序列,不翻译的外显子1和内含子1.上游调控序列中含有TATA box,CAAT box和CArG box等与转录活性密切相关的作用元件,并且在稀有鱼句鲫β-actin基因第一个内含子中也含有1个CArG调控元件.将该启动子片段克隆到绿色荧光表达载体(pAcGFP1-1)上,显微注射入稀有鱼句鲫的受精卵中,通过荧光显微镜能观察到绿色荧光蛋白的表达.本实验成功分离了具有驱动活性的稀有鱼句鲫β-actin基因启动子.
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