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目的
观察胆管癌细胞株单胺氧化酶A(MAOA)对CD8＋T细胞抗肿瘤免疫功能的影响。
方法采用Tet-on 3G诱导表达系统在人胆管癌细胞株中过表达MAOA；从正常人外周血中分离CD8＋T细胞，分别与过表达MAOA及低表达MAOA的胆管癌细胞混合培养48 h，流式细胞仪检测CD8＋T细胞表达颗粒酶B、穿孔素、程序性死亡受体(PD)-1、细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4的水平，检测各组CD8＋T细胞的坏死和凋亡；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CD8＋T细胞分泌干扰素(IFN)-γ的水平；CD8＋T细胞分别与上述胆管癌细胞株混合培养48 h进行肿瘤杀伤试验，检测各组肿瘤细胞释放乳酸脱氢酶(LDH)的水平。
结果与过表达MAOA胆管癌细胞组比较，低表达MAOA胆管癌细胞组的CD8＋T细胞表达颗粒酶B、穿孔素减少(分别为44.2%比51.5%，P＝0.000和51.8%比74.3%，P＝0.000)，表达PD-1及CTLA-4水平较高(分别为81.70%比21.30%，P＝0.000和16.00%比8.49%，P＝0.000)，分泌IFN-γ减少[(7 562.0±927.5) pg/ml比(10 107.0±1 162.0) pg/ml，P＝0.229]，CD8＋T细胞凋亡比例较高(26.43%比13.35%，P＝0.000)，肿瘤细胞释放LDH水平较低[(12.70±1.49)%比(22.88±2.93)%，P＝0.036]，提示该组CD8＋T细胞肿瘤杀伤能力降低。
结论胆管癌MAOA表达下调可抑制CD8＋T细胞抗肿瘤免疫功能，MAOA可望作为调控胆管癌肿瘤免疫的新靶点。