HPLC法同时测定附子中6种单酯和双酯型生物碱

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目的建立附子中单酯及双酯型生物碱成分的高效液相色谱定量方法。方法附子干燥粉末用氨水浸润后,以异丙醇-醋酸乙酯(1∶1)超声提取30min,提取液蒸干后溶于0.01%盐酸甲醇中,经微孔滤膜滤过后,20μL进行HPLC分析。HPLC分析采用Zorbax Extend-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-40mmol/L醋酸铵缓冲液(氨水调pH10.0)为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,检测波长230nm。结果6种被测生物碱成分,包括乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱分离良好,各成分质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系(r>0.999),重现性好,6种成分的RSD(n=5)均小于1.50%;平均加样回收率(n=5)为98.20%~100.47%;最低检测限分别为0.26、0.36、0.92、0.30、0.52、0.82ng。结论本研究所建立的HPLC方法稳定可靠、简便易行,可用于附子类药材中单酯型和双酯型生物碱的同时定量分析,为附子药材及其炮制品的质量评价和质量控制奠定了基础。
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