大肠杆菌NrfA蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备

来源 :安徽农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xsh3310

【摘要】

：

[目的]克隆大肠杆菌NrfA基因,构建pET-28a（＋）-NrfA表达载体,制备相应的多克隆抗体并对其进行鉴定。[方法]以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到NrfA基因编码区,构建pET-28a（＋）-Nr

【作者】

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何婷婷龚钢明高然

【机构】

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上海师范大学生命与环境科学学院,上海应用技术学院生物工程系,浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所

【出处】

：

安徽农业科学

【发表日期】

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2012年10期

【关键词】

：

NrfA基因原核表达多克隆抗体 NrfA gene Prokaryotic expression Polyclonal antibody

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[目的]克隆大肠杆菌NrfA基因,构建pET-28a（＋）-NrfA表达载体,制备相应的多克隆抗体并对其进行鉴定。[方法]以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到NrfA基因编码区,构建pET-28a（＋）-NrfA表达载体;经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白;再免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,Western Blotting检测抗体的特异性。[结果]构建的表达载体pET-28a（＋）-NrfA在大肠杆菌中诱导后可高效表达NrfA蛋白;免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测

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