【摘 要】
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本研究从连云港海泥中筛选产普鲁兰酶菌株,利用形态学、生理生化特征、基因序列(16S rRNA和gyr B)进行分析鉴定。利用产酶菌株发酵制备普鲁兰酶,初步纯化后分析其酶学性质。
【机 构】
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淮海工学院海洋生命与水产学院,江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室
【基金项目】
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江苏省普通高校自然科学基金(14KJB180002);江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室项目(2015HYB13);淮海工学院研究生科研创新项目(XKYCXX2016-5)
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本研究从连云港海泥中筛选产普鲁兰酶菌株,利用形态学、生理生化特征、基因序列(16S rRNA和gyr B)进行分析鉴定。利用产酶菌株发酵制备普鲁兰酶,初步纯化后分析其酶学性质。利用该普鲁兰酶粗提物对海带多糖进行水解,并对其水解产物进行抗氧化活性分析。结果表明:筛选得到一株产普鲁兰酶的巨大芽孢杆菌P6(Bacillus megaterium),经发酵纯化后普鲁兰酶比活力为62.3 U/mg,分子量约为43 k Da。该酶的最适反应温度为45℃,最适p H为6.5,在温度40℃下保温5 h,相对残余酶活达95%以上,而60℃下保温1 h,酶全部失活。在p H6~7.5之间保温12 h后,该酶仍有40%以上的相对残余酶活。DPPH和·OH自由基清除实验表明:海带多糖经普鲁兰酶水解后抗氧化活性显著增强(p<0.05),为普鲁兰酶在食品工业中的应用研究提供了新的方向。
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