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pBV—IL—6重组质粒的构建及其在E.coli细胞中的超高表达

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aini412319016

【摘 要】

：

本研究通过计算机分析设计、人工合成的寡核苷酸引物进行定点诱变和转译起始区优化,再经 PCR 扩增和体外重组,获得重组质粒 pBV-IL-6,转化大肠杆菌获得重组人白细胞介素6的工

【作 者】

：

任启生 王嘉玺 

【机 构】

：

军事医学科学院基础医学研究所,军事医学科学院基础医学研究所北京100850,北京100850

【出 处】

：

中国免疫学杂志

【发表日期】

：

1992年3期

【关键词】

：

白细胞介素6 转译起始 定点诱变 Interleukin-6 Overexpression Translation initiation Site-spe 

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本研究通过计算机分析设计、人工合成的寡核苷酸引物进行定点诱变和转译起始区优化,再经 PCR 扩增和体外重组,获得重组质粒 pBV-IL-6,转化大肠杆菌获得重组人白细胞介素6的工程菌 EcoliJM103/pBV-IL-6.结果,表达 IL-6占菌体总蛋白的71%.经 IL-6依赖的小鼠杂交瘤细胞系7TDI 和^?H-TdR 掺入法测定表达产物粗提物的 IL-6生物活性为10⁶U/L,经凝胶过滤纯化与复性之后 IL-

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