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目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定玉郎伞中水黄皮素含量的方法。方法以CLC-ODS（6.0mm×150mm,5μm）为色谱柱,[0.05mol/L庚烷磺酸钠-0.05mol/L磷酸二氢钾（3∶5）]-乙腈（1∶1）用磷酸调pH至3.0为流动相,流速1.0ml/min,检测波长261nm,柱温30℃。结果水黄皮素的线性范围为0.099～0.998μg,平均回收率为100.3%（RSD=1.2%）。结论所建立的HPLC法可用于玉郎伞中水黄皮素含量测定及其质量控制。