论文部分内容阅读
目的
研究神经源性分化因子(NeuroD)对放射性肠损伤的治疗作用。
方法采用原核表达系统表达、纯化NeuroD与绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白(NeuroD-EGFP融合蛋白)，利用倒置荧光显微镜观察NeuroD-EGFP融合蛋白的体外进入细胞的效率。40只C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为正常对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、EGFP组、NeuroD-EGFP融合蛋白组，每组10只。除正常对照组外，其余3组动物经9 Gy γ射线全身照射后，观察NeuroD-EGFP融合蛋白在小肠上皮细胞内的分布情况和NeuroD对放射性肠损伤的治疗作用。
结果纯化得到了NeuroD-EGFP融合蛋白。细胞上清中加入NeuroD-EGFP融合蛋白后，可见绿色荧光聚集在细胞内部，表明其可穿过细胞膜进入细胞内。小鼠腹腔注射NeuroD-EGFP融合蛋白5 h后，小肠绒毛上皮细胞内部有绿色荧光聚集。小鼠照射后3.5 d，NeuroD-EGFP组小鼠绒毛高度高于PBS及EGFP组(F＝49.49，P<0.01)，隐窝深度及隐窝数目大于PBS及EGFP组(F＝16.72、10.32，P<0.01)。
结论NeuroD蛋白可促进放射后肠道绒毛及隐窝的修复，对放射性肠损伤具有治疗作用。