【摘 要】
：
建立一种可以快速鉴别诊断猪流行性腹泻病毒（PEDV）经典毒株和变异毒株的TaqMan双重实时荧光定量PCR。参照GenBank中收录的36株经典毒株和变异毒株的基因序列，设计特异性引物和探针优化反应条件。进行双重实时荧光定量PCR的特异性试验、灵敏性试验和重复性试验，并绘制标准曲线。本研究建立的方法和国家标准方法同时对临床收集的样品进行检测。通过条件优化，该方法的最佳退火温度是60℃，最佳引物浓度
【基金项目】
：
北京市博士后工作经费资助项目（2022-22-130）； 中药研究所中药药理学创新团队（CI2021B015）；
论文部分内容阅读
建立一种可以快速鉴别诊断猪流行性腹泻病毒（PEDV）经典毒株和变异毒株的TaqMan双重实时荧光定量PCR。参照GenBank中收录的36株经典毒株和变异毒株的基因序列，设计特异性引物和探针优化反应条件。进行双重实时荧光定量PCR的特异性试验、灵敏性试验和重复性试验，并绘制标准曲线。本研究建立的方法和国家标准方法同时对临床收集的样品进行检测。通过条件优化，该方法的最佳退火温度是60℃，最佳引物浓度为0.5 μmol/L，最佳探针浓度为0.5 μmol/L。本方法对猪场常见疫病病毒PRRSV、ASFV、CSFV、PCV2、PCV3、PRV、PPV、TGEV均无交叉反应，特异性强。对N基因和S基因的检测下限分别为1 copies/μL和10 copies/μL。以N基因和S基因重组质粒构建的标准曲线具有良好的线性关系，线性相关系数(R2)均为0.999。组内和组间变异系数均小于2%，具有良好的重复性。临床样品检测结果为阳性率17.09%，与国标推荐的检测方法阳性率一致；变异毒株阳性率80%，经典毒株阳性率20%，与扩增S基因测序比对后结果一致。本研究建立一种具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点的双重实时荧光定量PCR方法，对PED风险预警及毒株分型具有重要意义。
其他文献
中国传统文化作为中华民族的发展根基，为中华民族儿女提供精神力量。现今动画产业快速发展，中国动画电影也融入了丰富的传统文化元素，在世界电影市场中形成了特色的“中国电影内容”。文章以《大鱼海棠》为例，从电影的内在表现、外在表现和文化启示这三方面出发，分析了该动画电影对中国传统文化元素的运用。
＜正＞中国科学院青岛生物能源与过程研究所研究员武建飞团队，多年来深耕正极材料及高性能电解液领域，近期在高电压电解液体系开发应用方面取得关键性进展。研究团队开发了一种新型的高压氟化电解液体系，将NCM811正极材料的工作电压从4.2V提高到4.6V，拓展了三元体系的使用上限和应用范围，解决了两个重要问题：提高了高镍三元正极体系的比容量和工作电压，抑制NCM811正极在高电压下的结构相变、过渡金属离子
该文利用常规观测资料（实况探空资料、自动站雨量数据）以及ECMWF、SWC-WARMS（西南区域模式）、GRAPES-MESO、GRAPES-GFS对比分析了2019年在副高边缘环流形势下的2次四川盆地区域性暴雨天气过程。结果表明：（1）初始场相似的2次过程，导致强降水落区不同的主要原因在于副高的动态变化不同，其次西风带槽脊的细微差异以及低层水汽条件的差异也与降水落区息息相关。（2）ECMWF在这
在油田注水采油时,驱替速度是影响最终驱替效率的重要因素之一。通过对储层真实砂岩进行CT扫描,得到岩层内部的具体信息,然后将得到的CT图片通过腐蚀膨胀进行图像二值化处理,选取其中的一块400×400像素的具有代表性的区域（REV）,使用MIMICS建立40×40mm大小的3D模型,并通过3D打印机制作透明可视化模型并进行后处理。然后使用模型进行18组不同速率下的微观水驱油实验。分析数据得到不同注入速
基于东莞市的调研发现,在校大学生有创业意愿比例高达37%,人文社会科学专业的创业意愿较高,自然科学专业较低;大四学生创业意愿最高,其他年级次之;团队创业是在校大学生创业的主流形式;商业服务和贸易行业是创业首选,部分新兴行业受青睐。突出问题有:创业意愿较高但付诸行动的偏少、创业动机过于功利、不积极储备创业知识、不主动关注创业政策动态。根据调查提出相应对策建议。
青藏高原是我国的水塔，西风与季风及其相互作用是导致亚洲天气和气候变化最重要的环流系统。本文基于1981～2020年大气再分析资料，采用经验正交函数分解方法（Empirical Orthogonal Function,EOF）提取了西风与季风季节循环分量在青藏高原的耦合模态，并对其季节变化特征进行分析。研究发现，第一主模态方差贡献率高达78.39%，主要反映的是东亚季风、南亚季风和对流层高层中纬度西
作者通过参加全国中药特色技术传承培训项目，通过理论课程和实践实训方式学习全国各地中药特色技术经验，通过对全国12个省市区具有代表性的培训基地观摩学习，结合多年实践工作经验及体会，从中药饮片建立可追溯体系、医院中药饮片质量管理方面探讨中药饮片质量控制体系建立，对部分贵重中药材、容易混淆的常用药材品种性状鉴别经验进行总结与分析，以促进中药特色技术传承。
目的 探讨达格列净联合运动训练在射血分数中间值的慢性心力衰竭（HFmrEF）合并2型糖尿病患者心脏康复中的应用价值。方法 选取南京市胸科医院2019年1月至2021年1月收治的HFmrEF合并2型糖尿病患者150例（3例失访）,随机分为对照组（n=50）、达格列净治疗组（n=49）和达格列净联合运动康复组（联合组，n=48）。对照组只给予常规抗心力衰竭（HF）药物治疗，达格列净组在对照组基础上加用
目的 观察远近同调思想对非脊髓型颈椎病的临床疗效及用时情况。方法 选择2019年8月—2021年3月北京市昌平区中西医结合医院推拿科、平谷区中医院推拿科非脊髓型颈椎病患者随机分为远近同调组65例、颈椎局部整复组65例。远近同调组采用侧卧位牵张力下旋转定位复位技术、并且对全脊柱进行查体，触诊发现有张力异常关节，关节突关节异常压痛处均做轻手法复位治疗，颈部理筋整复组给予颈背部理筋点穴及颈椎定位旋转扳法
新型城镇化是推动我国经济社会高质量发展的重要引擎，党的十八大以来，我国新型城镇化建设取得历史性成就：城镇化水平连上新台阶，“两横三纵”城镇化战略格局基本形成，城镇基础设施水平明显改善，.城镇人居生态环境质量明显改善，城乡融合发展迈上新台阶。“十四五”时期，我国新型城镇化建设进入新阶段，较于与以往的城镇化发展，我国新型城镇化将出现以下新的特点：城镇化率增速将出现调整换挡，.城镇化长期滞后于工业化的情