成肌细胞介导的hF Ⅸ蛋白在小鼠体内的持续表达

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目的:

以小鼠C2C12成肌细胞为对象开展血友病乙基因治疗研究。

方法:

首先将构建好的带有MCK增强子和hCMV启动子的反转录病毒载体G1NaMC Ⅸ转染PA317细胞,并用其上清感染C2C12细胞,所得克隆细胞在离体分别进行了Southern、Northern、Western鉴定。进一步用带有hF Ⅸ cDNA的C2C12细胞进行C3H小鼠活体表达研究。

结果:

hF Ⅸ活体表达量与细胞注射数量、细胞离体表达量呈正相关,使用免疫抑制剂可提高hF Ⅸ活体表达量并延长表达时间;较长时间间隔后进行重复注射亦可延长hF Ⅸ表达时间。

结论:

同种异体成肌细胞存在免疫排斥现象,较长时间间隔重复注射可提高移植细胞存活率,从而有助于实现成肌细胞介导的血友病乙基因治疗。

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