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为解决枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在发酵产亮氨酸氨肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)需额外添加抗生素的问题,该研究构建了1株食品级产LAP重组B.subtilis。首先通过Cre/lox系统敲除B.subtilis 168基因组中D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到缺陷型菌株BS168(dal)^-。其次使用高斯组装的方法构建以dal作为标记基因的质粒pMA5-lap-dal(Amp^R,Ori)-并转化至BS168(dal)^-中得到食品级重组菌BS168(