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目的:建立HPLC法同时测定水蛭(蚂蟥)药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、水蛭胺C、水蛭胺A、水蛭胺B的含量。方法:采用YMC-Pack ODS-AQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以10 mmol·L-1的磷酸二氢钾溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱(0~15 min,0%B;15~40 min,0%B→20%B;40~60 min,20%B),流速为0.8 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、水蛭胺C、水蛭胺A、水蛭胺B的线性范围分别为0.01855~0.3710μg(r=0.9999)、0.04050~0.8100μg(r=0.9999)、0.01595~0.3190μg(r=0.9998)、0.01250~0.2500μg(r=0.9997)、0.01415~0.2830μg(r=0.9998)、0.01530~0.3060μg(r=0.9997)、0.01445~0.2890μg(r=0.9999);平均加样回收率(n=6)分别为100.2%、99.5%、100.1%、99.0%、100.0%、100.1%、100.6%,RSD分别为0.89%、0.85%、1.2%、1.3%、1.2%、1.2%、1.1%。结论:本文建立的方法经方法学验证可用于评价水蛭(蚂蟥)药材质量。水蛭药材含量测定结果显示,尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、水蛭胺C、水蛭胺A、水蛭胺B为以蚂蟥W.pigra入药的水蛭药材的共有成分,以7个成分的总体含量来控制药材质量更为合理。