【摘 要】
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目的 :建立一种客观、敏感的检测IL 2 /IL 4细胞因子基因表达变化的方法。 方法 :采用TRIzol试剂提取免疫排斥 /免疫耐受大鼠脾脏组织总RNA ,分光光度计法定量。取 2 μg总RN
【机 构】
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新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆医科大学基础医学院免疫学教研室,新疆医科大学新疆器官移植研究所
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目的 :建立一种客观、敏感的检测IL 2 /IL 4细胞因子基因表达变化的方法。 方法 :采用TRIzol试剂提取免疫排斥 /免疫耐受大鼠脾脏组织总RNA ,分光光度计法定量。取 2 μg总RNA ,采用RT PCR法逆转录 扩增IL 2、IL 4和内参照 β actincDNA ,扩增产物经电泳分离后 ,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析 ,检测其相对表达量。 结果 :RT PCR产物经电泳后 ,β actin、IL 2和IL 4分别在 2 2 6bp、342bp和 332bp处出现明显条带 ,与预定条带大小相一致 ;免疫耐受组IL 4与免疫排斥组IL 2的表达有明显差异 ,在免疫耐受组中IL 4表达增高 ,而在免疫排斥组中IL 2表达增高 ,内参照 β actin扩增条带亮度在两组中相同 ,PCR产物量与扩增初始模板量之间存在良好的对应关系。 结论 :半定量RT PCR检测是一种从少量细胞中快速、简便、可靠地检测特异基因mRNA表达的方法
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