探讨JAZF1过表达对棕榈酸诱导肝细胞促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及白细胞介素(IL)-8表达的影响。
方法采用棕榈酸作用于肝细胞以构建肝细胞脂肪变性模型,并行油红O染色;将Ad-JAZF1转染入脂肪变性的肝细胞模型中,用RT-PCR法检测转染前后肝细胞JAZF1、TNFα、MCP-1及IL-8 mRNA表达,Western blot法检测JAZF1蛋白表达水平,酶联免疫吸附法检测上述促炎因子的分泌情况。对数据的比较,组内采用配对t检验;组间采用方差分析,进一步两两比较采用LSD法。
结果与对照组相比,不同浓度(0、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)棕榈酸诱导肝细胞促炎因子TNFα、MCP-1及IL-8 mRNA的表达,其相对表达量随着浓度升高呈逐渐升高趋势(P < 0.01), 但在0.5 mmol/L和1 mmol/L浓度组间,差异没有统计学意义。以0.25 mmol/L棕榈酸作用于肝细胞0、6、12、24、48 h,促炎因子TNFα、MCP-1及IL-8 mRNA的相对表达水平随时间延长逐渐升高,在12 h达高峰,随后逐渐下降,呈时间依赖性,且各时间组组间差异均有统计学意义 (FTNFα = 26.51,FMCP-1 = 57.20,FIL-8 = 353.85,P值均< 0.01)。与Ad-GFP空载体组相比,Ad-JAZF1转染组肝细胞JAZF1 mRNA和蛋白质的相对表达水平明显增高。JAZF1过表达可以抑制肝细胞中由棕榈酸诱导的TNFα、MCP-1及IL-8 mRNA的表达,使其相对表达量分别降低89.69%、77.68%及83.21%(P < 0.01),同时TNFα、MCP-1及IL-8相对分泌量也分别减少37%、37%及41% (P < 0.01)。
结论棕榈酸能促进肝细胞促炎因子mRNA的表达;JAZF1基因过表达能够抑制棕榈酸诱导的肝细胞促炎因子的表达及释放。