【摘 要】
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为了构建荷包猪SLA-3-HB 01基因四聚体前体链原核表达载体,并获得SLA-3-HB01表达蛋白,试验以SLA-3-HB01/pMD18-T为模板进行PCR扩增四聚体前体链SLA-3-HB01-BSP,并克隆至pMD19
【机 构】
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大连大学生命科学与技术学院,韶关学院英东生命科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目:CRISPR/Cas9技术构建sT2细胞系筛选猪源病毒SLA-Ⅰ限制性CTL表位的研究(31672525);辽宁省教育厅重点实验室项目(LZ2015003);辽宁省大学生创新创业训练计划项目(201611258008)
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为了构建荷包猪SLA-3-HB 01基因四聚体前体链原核表达载体,并获得SLA-3-HB01表达蛋白,试验以SLA-3-HB01/pMD18-T为模板进行PCR扩增四聚体前体链SLA-3-HB01-BSP,并克隆至pMD19-T载体中,经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切筛选阳性克隆并测序,目的基因连接至表达载体pET-21a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白大小及表达情况,提取包涵体并进行检测。结果显示,PCR成功扩增得到SLA-3-HB01-BSP
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