【摘 要】
：
本研究探讨人脐血CD34+细胞体外扩增的巨核祖细胞的生物学特性及其免疫原性变化,为体外扩增脐血巨核祖细胞的临床应用提供实验依据。采用Ficoll-Hapaque分离法分离人脐血单个
【机 构】
：
协和干细胞基因工程有限公司,中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所
论文部分内容阅读
本研究探讨人脐血CD34+细胞体外扩增的巨核祖细胞的生物学特性及其免疫原性变化,为体外扩增脐血巨核祖细胞的临床应用提供实验依据。采用Ficoll-Hapaque分离法分离人脐血单个核细胞,应用免疫磁珠法(MACS)再分离富集CD34+细胞,在含血小板生成素(TPO,50ng/ml)、白介素-11(IL-11,50ng/ml)和肝素(25U/ml)的无血清液体培养体系中培养14天。用流式细胞术检测扩增产物免疫表型(CD34+、CD41a+、CD61+、CD34+CD41a+及CD34+CD61+)、巨核细胞凋亡率及其表面HLAⅠ、Ⅱ类分子的表达,并进行巨核细胞集落形成单位(CFU-Mk)的检测。结果显示:脐血CD34+细胞能够有效地向巨核细胞分化,CD41a+和CD61+细胞比例在培养第14天达到峰值,CD34+CD41+和CD34+CD61+细胞比例在扩增第7天达到最高峰〔分别为(3.41±2.80)%和(1.89±1.43)%〕;CFU-Mk大集落在扩增第7天达到高峰〔(20.66±32.79)倍〕,小集落在扩增第10天达到高峰〔(435.62±482.65)倍〕;在培养7、10和14天时巨核细胞的凋亡率分别为(19.48±9.64)%、(26.87±9.03)%和(52.46±11.74)%,其中培养7天和10天的凋亡率无显著性差异(p>0.05),培养14天的凋亡率显著高于7天和10天(p均<0.05);巨核细胞表面HLAⅠ、Ⅱ类分子的表达随着扩增天数的延长逐渐降低,其中培养0到10天阶段下降明显。结论:采用TPO+IL11+肝素组合,可以有效地扩增脐血巨核祖细胞;培养7天,CFU-Mk大集落扩增倍数、CD34+CD41+和CD34+CD61+细胞比例均达高峰,这是巨核祖细胞体外扩增的较佳培养时间。
其他文献
目的检测miR-133b在帕金森病(PD)患者脑脊液中的表达情况,为帕金森病的早期诊断提供参考依据。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测46例PD患者、25例头痛患者和22例健康人脑脊液
浅析日本发动侵略战争的原因王芳唐鹤龄近年来，日本政府在对待二战的侵略历史问题上，不是认真反省过去的侵略罪行，接受历史的教训，并妥善处理给被侵略国家和人民造成的损害等等遗
本研究探讨siRNA(small interfering RNA)对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1的mll-af9融合基因的影响。选择THP-1细胞特有的mll-af9融合基因为靶基因,设计并合成siRNA片段。
<正> 独立审判,是我国的一项重要的社会主义司法原则,是社会主义民主和社会主义法制的重要组成部分。五届人大二次会议上通过的人民法院组织法、刑事诉讼法中对这一重要原则
由于信息时代的步伐不断加快,这也间接地使企业的经营的方式和管理模式发生了改变,这也会影响到财务管理及相应的会计核算的形式。在目前的市场经济下,企业通过推进企业财务
目的:观察经行头痛汤治疗肝郁血瘀型经行头痛的临床疗效。方法:经前1周服用经行头痛汤,每剂分3次服用,每天服用2次,经净后停药,连续服用3个月经周期。结果:经过3个月经周期的
高职院校二级学院加强教学过程管理,强化教学质量监控,是提高教学质量确保人才培养质量的必然要求。本文结合笔者学院护理学院加强教学过程质量监控的实践,就其效果进行了分
从五脏六腑皆令人咳,非独肺也,而以肺胃关系最为密切之根本出发,浅析了徐艳玲教授运用肺胃相关理论治疗肺系疾病的两个治法。
<正> 电子组装是电子学的一门边縁学科,它的定义为“将一张电原理图转变成为一个实用的具有一定形状尺寸的电子硬件(组件、插件、分机、分系统和整机)的技术过程”。电子技术
本研究探讨FCGR2B232I/T单核苷酸多态性与儿童特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytope-nic purpura,ITP)易感性的相关关系。采用多聚酶链式反应-直接测序方法检测7