猪瘟病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用

来源 :福建省畜牧兽医学会畜禽传染病防治专业委员会第四届第三次学术研讨会暨福建省第三届猪病学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xukuikui
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本文根据Genbank以发表的HCV 5’NTR核苷酸序列设计一对特异性引物,扩增位置在整个基因的221-377位,片段长度为167bp。提取本实验室保存的HCV细胞毒的RNA,并反转录成cDNA,以此cDNA为模板建立了SYBR Green I实时定量PCR检测猪瘟病毒的方法。并用该方法检测送检的临床疑似病料,结果表明,本研究建立的HCV-SYBR Green I PCR特异性强,与FMDV、PCV2、PRRsV、PPV、PRV等常见猪病毒病病原没有交叉反应;灵敏度高,可以检测到5.3×102的病毒拷贝数;操作简单,耗时短,只需3小时i即可完成整个实验过程,可初步用于临床检测。
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