目的 观察乌梅丸加减方口服治疗失眠的临床疗效，及其对患者肠道菌群的影响。方法 选择失眠患者12例，给予乌梅丸加减方口服治疗，疗程为1周。记录并比较患者治疗前后匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）和中医证候积分，并评价临床疗效；采用高通量测序法检测患者治疗前后粪便中肠道菌群变化，记录α多样性相关指标（ACE指数、Chao1指数、Shannon指数、Simpson指数）及门水平、属水平上的肠道菌群丰度。结果 与治疗前比较，患者治疗后PSQI中睡眠质量、睡眠时间、入睡时间、睡眠障碍、睡眠效率、催眠药物评分及总分、中医证候积分均降低（P均<0.05）。患者治疗后痊愈1例、显效7例、有效3例、无效1例，总有效率91.67%（11/12）。与治疗前比较，患者治疗后ACE指数、Chao1指数均升高，Simpson指数降低（P均<0.05）；患者治疗前后Shannon指数比较P>0.05。与治疗前比较，患者治疗后厚壁菌门和变形菌门菌群丰度均升高，拟杆菌门和放线菌门菌群丰度均降低（P均<0.05）；患者治疗前后梭杆菌门、蓝菌门、疣微菌门、软壁菌门和迷踪菌门菌群丰度均无明显变化（P均>0.05）。与治疗前比较，患者治疗后拟杆菌属和粪杆菌属菌群丰度均下降，普雷沃菌属、巨单胞菌属、双歧杆菌属和毛螺菌属菌群丰度均升高（P均<0.05）。结论 乌梅丸加减方可显著提高失眠患者的睡眠质量，改善失眠症状，其作用机制可能与改善肠道菌群丰度和多样性有关。