ED-L2-LMP1-EGFP融合基因慢病毒载体的构建及鉴定

来源 :广东医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songjuan119004
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的构建及鉴定EB病毒LMP1基因和增强型绿色荧光蛋白基因融合慢病毒表达载体。方法应用DNA重组技术,将EB病毒ED-12启动子和LMP1基因克隆到带有EGFP基因的FUGW慢病毒表达载体上,筛选阳性克隆,经限制性酶切和PCR扩增鉴定重组载体后,以脂质体介导法将慢病毒包装系统的包装结构基因pCMVΔ8.9、包膜基因VSVG和带目的基因ED-12-LMP1-EGFP载体共同转染到293FF包装细胞内包装病毒,荧光显微镜下观察包装细胞报告基因表达情况,收集病毒上清、浓缩鉴定、测定重组病毒的滴度。PCR和免疫组
其他文献
目的从质粒pVAE中克隆目的基因Esat6,与hGM—CSF-起构建双顺反子表达载体pIEG,并进行鉴定。方法以质粒pVAE为模板扩增出Esat6基因,与pIRES的MCSA进行重组,构建pIEsat6重组质粒。
应用红外热图像技术,观察了60名健康男性青年在平行秋千刺激下,诱发运动病引起的面色苍白前后,面部体表温度的变化,结果提示:红外热图技术对定量评价由运动病引起的面苍白程度有一定
目的观察中华眼镜蛇毒活性组分(China cobra venom active factor,CCVAF)对新生牛肺主动脉血管内皮细胞增殖的抑制作用,并探讨其抑制细胞增殖的胞内机制。方法采用胰酶消化法体外
目的探讨特异性免疫细胞治疗原发性再生障碍性贫血的临床疗效。方法抽取患者外周血30-50ml,分离单个核细胞经白细胞介素2、粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子混合培养48h,收集形成
光盘作为数字视频图像载体已进入实用化阶段,本文介绍光盘数字视频图像播放系统的结构原理,用普通数字音频播放机改为同时具有播放数字视盘和音盘功能的系统原理方案及这一技术
综述了基于半导体光放大器的全光型波长转换器在未来高速大容量通信系统中的应用,比较了不同工作方式的优缺点,介绍了转换器的最新研究进展。
目的探讨肾移植受者sCD30(soluble CD30)表达与移植肾慢性排斥反应的关系。方法用ELISA方法对80例肾移植2年以上受者血样进行sCD30定量测定,同时进行移植肾穿刺活检、PRA、血环
文中详细叙述并讨论载于小卫星遥感的可见、近红外、热红外成像光谱仪的光学系统设计考虑,并列出设计结果。
通过对混合工质的研究,全封闭压缩机的改装,油分离器以及节流制冷器的设计,研制了一台闭合循环节流制冷机,为红外器件等高技术领域的需求提供了新一代冷源。
目的评价经导管封堵术与开放性手术治疗先天性室间隔缺损(VSD)预后的临床意义。方法分析124例VSD术后24h动态心电图,其中经导管介入封堵术94例(介入封堵治疗组),开放性修补术30例(开