【摘 要】
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[背景]病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是植物抗病毒侵染的一种自然机制.[方法]以马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)脉坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat
【机 构】
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湖南农业大学植物保护学院,长沙 410128植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室,长沙 410128;湖南省烟草科学研究所,长沙 410004;长沙市烟草公司,长沙 410010;湘西州烟草公司,吉
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[背景]病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是植物抗病毒侵染的一种自然机制.[方法]以马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)脉坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因为靶向序列,构建烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默表达载体pTRV2-CP,转化农杆菌GV3101后,与pTRV1-GV3101混合成TRV::CP(OD6000.4～0.6)喷施处理剪叶后的烟苗,测定其侵染效率.人工接种PVY于对照及TRV::CP处理的烟苗,RT-qPCR检测、表型观察和小区试验评价TRV介导的VIGS体系对PVY侵染的沉默效果.[结果]①与TRV::00相比,接种PVY 35 d时,TRV::CP处理的烟株中PVY累积量减少了72.8％;②VIGS表达载体45 d内能有效表达;③温室盆栽和田间小区试验TRV::CP处理对PVY防治效果分别达到85.12％和73.08％.[结论]研究建立的VIGS体系能够沉默PVY CP基因的表达,有效防治烟草马铃薯Y病毒病,为PVY的防治提供了新的方法.
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