【摘 要】
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用混合酸酐法(MA)将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用UV和SDS-PAGE鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/c小鼠,细胞融合技术建立高亲和力RAC单克隆抗体(mA
【机 构】
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河南科技学院动物科学学院; 河南省动物免疫学重点实验室;
【基金项目】
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国家“十一五”科技支撑计划重大项目资助(2006BAK02A21/1)
论文部分内容阅读
用混合酸酐法(MA)将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用UV和SDS-PAGE鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/c小鼠,细胞融合技术建立高亲和力RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb;应用RAC mAb研制RAC残留快速检测ciELISA试剂盒(RAC-Kit),并测定其性能。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为24.5∶1;筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株亲和常数(Ka)为1.65×1010L/mol;RAC-Kit的检测限为0.5ng/ml,检测范围为0.5~151ng/ml,饲料样、猪尿样的平均添加回收率为87.2%,89.4%,平均批内和批间变异系数小于15%,与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR%)为9.7%,与其它化合物无CR,RAC-Kit在4℃保存期为180d。
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