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目的
建立一种骨髓增生性疾病JAK2 V617F突变快速检测体系，并调查中国正常人群中JAK2 V617F突变发生率。
方法根据JAK2基因V617F位点DNA参考序列，分别设计靶序列扩增特异性引物、突变和野生型特异性TagMan探针，建立并优化基于实时定量荧光PCR技术的检测体系并对体系的灵敏度、特异性，重复性进行评价。同时，采用大引物定点诱变和直接克隆技术，构建相应的阴阳性质粒DNA，以形成包含检测方法与质控品的完整应用体系。
结果建立了骨髓增生性疾病JAK2 V617F突变快速检测体系，此体系与传统Sanger测序比较，灵敏度和特异性均为100%，批内变异系数为0.006。同时，对1000份正常样本进行检测，检出JAK2 V617F突变1例，人群携带率1‰。
结论本研究建立的检测体系操作简单、快速准确，低成本高通量，可应用于常规临床检测。JAK2 V617F突变是一种罕见突变，但在骨髓增生性疾病患者中应作为首先检测位点。