嗜肠型小鼠肝炎病毒RT-PCR诊断方法的建立及其应用

来源 :实验动物与比较医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:menhuitou89
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目的建立小鼠肝炎病毒(MHV)RT—PcR检测方法,为小鼠的日常生产提供一种快速的监测手段。方法提取小鼠结肠组织的总RNA,通过反转录反应合成第一链cDNA,以其为模板,利用MHV的4对特异性引物,进行PCR扩增。对PCR反应条件(包括引物、引物浓度、退火温度、模版浓度等)进行优化。对PCR扩增出的基因片段进行克隆测序,进一步确定扩增结果的特异性。结果其中2对MHV引物具有良好的扩增性和特异性,利用这两对引物进行的PCR检测结果与ELISA检测结果相符。结论MHv的RT-PCR检测方法具有良好的特异性,并
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