银杏叶提取物对脐静脉内皮细胞Toll样受体4/核因子-кB途径及细胞间黏附分子1表达的影响

来源 :中国临床康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hujin68
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目的:观察具有抗血小板活化因子、清除氧自由基、抗氧化作用的银杏叶提取物对脂多糖介导的人脐静脉内皮细胞Toll样受体4/核因子-κB信号途径及细胞间黏附分子、E-选择素表达的影响。 方法:①实验于2003-01/2004-12在大连医科大学附属第二医院实验中心完成。取健康产妇分娩后的新鲜婴儿脐带(由本院分娩的产妇自愿提供),应用胶原酶消化人脐静脉内皮,收集内皮细胞进行培养。②将培养成融合状态的内皮细胞随机分为4组:对照组:M199培养基中不加其他干预物质;脂多糖组:M199培养基中加入脂多糖1mg/L;脂多糖+银杏叶提取物50组:预先加入银杏叶提取物50(80mg/L),60min后加入脂多糖1mg/L;脂多糖+咖啡酸苯乙酯组:预先加入咖啡酸苯乙酯(20mg/L)30min。干预12h,收集细胞检测Toll样受体4和细胞间黏附分子1、E-选择素表达水平;干预1h,收集细胞提取核蛋白检测转录核因子κBp65活化变化。③采用反转录聚合酶链反应检测Toll样受体4和细胞间黏附分子1、E-选择素mRNA表达水平;采用蛋白质印迹技术检测Toll样受体4蛋白表达水平及核因子-KB活化的变化;采用酶联免疫吸附方法检测人脐静脉内皮细胞表面细胞间黏附分子1,E-选择素蛋白表达。④多个样本均数的比较采用方差分析,多个样本均数的两两比较采用q检验 结果:①人脐静脉内皮细胞Toll样受体4mRNA和蛋白表达(A值):脂多糖组明显高于对照组(P<0.01),脂多糖+银杏叶提取物组和脂多糖+咖啡酸苯乙酯组明显低于脂多糖组(p<0.05~0.01)。②人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子1、E-选择素mRNA和蛋白表达(A值):脂多糖组明显高于对照组(P<0.01),脂多糖+银杏叶提取物组和脂多糖+咖啡酸苯乙酯组明显低于脂多糖组(P<0.05~0.01)。③人脐静脉内皮细胞核蛋白核因子-κBp65活化(A值):脂多糖组明显高于对照组(P<0.01),脂多糖+银杏叶提取物组和脂多糖+咖啡酸苯乙酯组明显低于脂多糖组(P<0.05)。 结论:银杏叶提取物可能通过抑制核因子-κB活化,进而减弱Toll样受体4/核因子-κB途径从而抑制脂多糖介导的黏附分子表达及炎症反应。
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