NRF-1基因敲除增加CoCl2诱导的NRK-52E细胞凋亡

来源 :宁夏医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：abenwin

【摘要】

：

目的探讨核呼吸因子-1(NRF-1)对氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)诱导细胞凋亡的影响。方法采用CRISPR在线工具构建NRF-1-sgRNA,CRISPR/Cas9质粒酶切及T4连接酶的连接构建NRF-1

【作者】

：

董飞孙红丽牛楠李卉赵瑞王婵赵巍

【机构】

：

宁夏医科大学,宁夏医科大学医学科学技术研究中心

【出处】

：

宁夏医科大学学报

【发表日期】

：

2020年4期

【关键词】

：

氯化钴大鼠肾细胞核呼吸因子-1 细胞凋亡 CoCl2NRK-52E cellsNRF-1apoptosis

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目的探讨核呼吸因子-1(NRF-1)对氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)诱导细胞凋亡的影响。方法采用CRISPR在线工具构建NRF-1-sgRNA,CRISPR/Cas9质粒酶切及T4连接酶的连接构建NRF-1基因敲除的慢病毒重组质粒lentiCRISPR-NRF-1-sgRNA,慢病毒包装后转染至NRK-52E细胞,通过嘌呤霉素筛选、流式细胞仪单选、T7E1酶切分析、Sanger测序及Western blot法检测NRF-1基因的表达水平;用含CoCl2(终浓度为600μmol

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