目的 构建血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因和铜绿假单胞菌外毒素衍生物(PE38)基因的真核融合表达载体,研究其在HEK293细胞中的表达情况.方法 通过PCR获得实验需要的VEGF165基因片段,通过酶切pRB391质粒获得铜绿假单胞菌外毒素衍生物PE38基因,再通过适当的酶切及连接反应,构建VEGF165与PE38融合基因的真核表达载体pIRES2-VEGF165-PE38-EGFP,重组质粒经限制性内切酶及DNA序列测定证实构建成功后,用Lipofectamine2000脂质体转染HEK293细胞,然后用RT-PCR及ELISA法检测VEGF165-PE38融合蛋门在HEK293细胞的表达.结果 酶切分析及DNA序列测定证实,VEGF165-PE38融合基因被成功克隆入真核表达质粒载体pIRES2-EGFP,RT-PCR及ELISA法检测证实重组基因可在HEK293细胞表达.结论 VEGF165-PE38融合基因可在HEK293细胞中表达,为进一步研究其对肿瘤血管内皮细胞的靶向毒性及临床应用奠定基础。