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球形金纳米颗粒对骨髓间充质干细胞自噬流和外泌体分泌的影响
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目的·探讨球形金纳米颗粒(Au NPs)阻断大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的自噬流对外泌体分泌的影响。方法·体外培养大鼠MSCs,分别以不同浓度Au NPs(0、15、30、90、150μg/m L)处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,以评估Au NPs细胞毒性。细胞分3组:正常对照组、Au NPs组(20μg/m L Au NPs作用72 h)和阳性对照组(5μmol/L氯喹作用4 h)。透射电镜下观察超微结构,超速离心提取细胞上清液外泌体,行纳米颗粒分析仪和电镜检测。共聚焦显微镜观察细胞自噬,Western blotting验证。结果·0~30μg/m L的Au NPs对细胞增殖的影响小。Au NPs组的MSCs外泌体分泌增多,体积减小,LC3和p62表达增高(均P<0.05),自噬小体增多,溶酶体和自噬小体融合受阻。结论·Au NPs阻断MSCs自噬流,调节外泌体分泌。
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