鸭坦布苏病毒E蛋白中和性单克隆抗体的制备

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本试验利用纯化的鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)奉贤株(FX2010)免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,筛选获得3株能够稳定分泌抗DTMUV的杂交瘤细胞,分别命名为:J1-E5-E4、7B5和1E5-B6,3株杂交瘤细胞诱导同品系小鼠的抗体效价为1:12800、1:6400和1:25600.间接ELISA和IFA结果显示,3株单抗均可以与DTMUV发生特异性反应.进一步研究发现,J1-E5-E4可以与DTMUV-E蛋白结合,使得表达E蛋白的293T细胞显现出特异性的绿色荧光;在病毒中和试验中,J1-E5-E4可以中和DTMUV,使其失去致死鸡胚的能力.这些结果表明,J1-E5-E4是一株针对DTMUV-E蛋白中和表位的单抗,该单抗将在DTMUV诊断和抗原分析中发挥重要作用.
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