pcDNA3.1F9质粒介导人凝血因子IX在肠上皮细胞中的表达

来源 :中国医师杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong573
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目的 探索肠上皮细胞用于血友病B基因治疗的可能性.方法用已构建好的质粒载体pcDNA3.1F9,以脂质体介导法转染肠上皮细胞SW480,RT-PCR 检测mRNA的转录,ELISA、一期法检测蛋白表达及凝血活性.结果转染后的细胞中有人凝血因子IX(human coagulation factor IX, hFIX) mRNA的转录;ELISA法测得转染后24h细胞上清中的hFIX蛋白量为(11.72±0.24)ng·106cell-1·24h-1,转染后48h hFIX蛋白量为(381.34±16.16 )ng·106cell-1·24h-1.一期法结果示细胞上清中的hFIX有凝血活性,转染后48h达(45±0.85)%·106cell-1.结论肠上皮细胞SW480转染pcDNA3.1F9质粒后可表达有凝血活性的hFIX,肠上皮细胞有望成为血友病B基因治疗的靶细胞。

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