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目的探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法，为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。方法分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞，用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征；收集第2代细胞，-80℃冻存。结果免眼结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞可以在体外成功培养，结膜上皮细胞呈圆形或多角形，成纤维细胞呈长梭形；冻存细胞1个月后复苏成功率达80％。结论组织块法和混合消化法培养可成功获得结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞。