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目的
采用RNA干扰(RNAi)技术沉默转化生长因子β1(TGF–β1)基因，观察RNAi的基因沉默效应及对人膀胱癌细胞株(EJ细胞株)中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。
方法构建基因TGF–β1特异性小干扰RNA(siRNA)表达载体，反转录(RT)–PCR及ELISA筛选出抑制效率最高的靶序列，分成EJ细胞组、对照组(TGF–β1组)、重组质粒组(TGF–β1 siRNA表达载体组)3组转染，Western印迹检测各组细胞VEGF蛋白表达水平。
结果成功构建基因TGF–β1特异性siRNA表达载体，RT–PCR及ELISA筛选出最佳抑制效果的序列[TGF–β1相对mRNA表达水平为0.92±0.19；ELISA检测的蛋白表达水平为(50±6) pg/ml]；转染后各组的VEGF蛋白表达水平为EJ细胞组(0.86±0.18) pg/ml，对照组(1.15±0.29) pg/ml，重组质粒组(0.45±0.16) pg/ml，重组质粒组明显低于EJ细胞组和对照组(均P<0.05)。
结论抑制TGF–β1基因能下调VEGF基因的表达，TGF–β1基因可能通过诱导VEGF基因的表达实现对膀胱肿瘤血管生成的调控。