【摘 要】
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目的 研究不同食品加工方式对提取鮟鱇鱼肉DNA的影响.方法 以实时荧光PCR方法检测鮟鱇鱼成分标准为例,采取水煮、微波、油炸3种处理方式,选用试剂盒提取DNA,利用核酸蛋白测定
【机 构】
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南京工业大学食品与轻工学院,南京,210009江苏省食品安全快速检测公共技术服务中心,南京,210009;南京工业大学食品与轻工学院,南京210009;江苏省食品安全快速检测公共技术服务中心,南京21
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目的 研究不同食品加工方式对提取鮟鱇鱼肉DNA的影响.方法 以实时荧光PCR方法检测鮟鱇鱼成分标准为例,采取水煮、微波、油炸3种处理方式,选用试剂盒提取DNA,利用核酸蛋白测定仪测定其在260 nm、280 nm处的吸光度,通过A260来计算核酸浓度,A260/A280来评估核酸的纯度.以提取的DNA为模板,进行实时荧光PCR扩增.通过Ct值判断不同加工方式对实时荧光PCR结果的影响.结果 水煮、微波、油炸3种加工方式中,油炸对DNA的影响最明显,当在高温下油炸时间过久会导致鱼肉焦糖化反应及蛋白质变性严重,变成具有一定孔隙的焦状物,此时鱼肉在提取DNA的过程中难以消化,造成DNA提取量少,最终导致实时荧光PCR结果假阴性.而水煮、微波两种加工方式即使处理时间过久也没有对实时荧光PCR结果产生明显影响.结论 在鱼制品使用实时荧光PCR方法检测时,应充分考虑加工方式对鱼制品DNA的影响.
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